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色譜柱的柱效檢測及保存方法
更新時間:2020-03-19   點擊次數(shù):3083次

氨基柱的柱效檢測及保存方法

  氨基柱是指以硅膠作為基質載體,鍵合氨基的色譜柱。氨基柱通常用于分析糖類化合物,所用流動相通常是甲醇、乙腈和緩沖鹽溶液,乙腈相對使用較多。

  氨基柱使用時易水解,要注意:

  1.pH值越低越有發(fā)生水解的危險,所以應嚴格控制pH范圍;

  2.流動相中水的比例越高越有發(fā)生水解的危險;

  所以,在使用后以及準備長時間放置該柱時,必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機溶劑中是很好的保養(yǎng)措施。

  氨基柱的柱效檢測:

  用于判斷一個用戶是否有經(jīng)驗的指標之一,是用戶是否習慣配制一些柱效檢測標準溶液。說到柱效檢測,來向大家提供一個方法,而且很通用,你也可以用同樣的標準溶液和流動相來檢測硅膠柱和氰基柱。

  流動相:10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0;

  標準溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯;

  檢測波長254nm。

  這個方法特別適用于新購氨基柱時即進行檢測,如有問題,可及時與氨基柱廠家溝通。也適合柱子在準備放置相當長一段時間之前,進行充分清洗后進行檢測作為記錄留檔。在平常的使用過程中,如果分析物是固定重復的,當然可以從對分析物的分離分析情況來作出判斷;但如果分析物和分析條件不同時,定期檢測柱效可以避免柱效下降導致分離不佳再分析查找原因這樣浪費人力物力的過程。特別要注意的是,當氨基柱(或氰基柱)在反相條件中使用時,如用該條件檢測,請注意流動相的換相過渡問題。

  氨基柱沖洗正相條件下使用的氨基柱就參照硅膠柱的清洗方法;反相條件下使用的氨基柱就參照C18的清洗方法。

  氨基柱的保存:

  1.正相使用時,將柱子沖洗干凈后,用正己烷-乙腈(99:1)保存。

  2.反相使用時,如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;長期不用時需將甲醇依次用異丙醇、CHCl3置換,后用正己烷保存。

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